冰凍切片的方法

 

　　標(biāo)本的處理：乳腺、子宮等大塊組織經(jīng)取材,組織周邊加包埋劑置于組織樣品冷凍頭,當(dāng)表面出現(xiàn)白色時(shí)表示組織已凍結(jié)即可切片。對小組織如腎穿刺的小組織,先取冷凍頭(樣品頭)加少許包埋劑置于速凍,用速凍器稍壓平,當(dāng)出現(xiàn)硬結(jié)時(shí)即平放小組織,再次置于冷凍組織,這樣將小組織墊高,就能快速切出高質(zhì)量的切片。

 

　　染色方法為HE染色法,步驟為:

 

　　切片用10%甲醛液固定30s

 

　　75%酒精30s

 

　　水洗

 

　　蘇木素溶液染細(xì)胞核2—3 min

 

　　水洗

 

　　1%鹽酸酒精分化

 

　　水洗

 

　　1%氨水液反藍(lán)

 

　　水洗

 

　　伊紅染細(xì)胞漿30s或1min

 

　　水洗

 

　　依次梯度酒精脫水

 

　　二甲苯透明一樹膠封固。

 

　　全自動(dòng)冰凍切片機(jī)切片技巧

 

　　各種組織經(jīng)凍結(jié)后,組織的硬度是不一樣的,組織切片的速度電不同軟的組織切片速度較慢,硬的組織切片速度較快。同時(shí)要選擇好鋒利無缺口的刀鋒，調(diào)節(jié)好防卷板與刀鋒的關(guān)系,經(jīng)調(diào)節(jié)好刀鋒的角度。只要技術(shù)人員熟練掌握機(jī)器的各種部件的作用和性能,認(rèn)識組織學(xué)結(jié)構(gòu),掌握好各種組織切片的適宜溫度,選擇好鋒利的刀鋒,以及調(diào)好刀鋒的角度,調(diào)節(jié)好刀鋒與防卷板的角度位置,配好固定液、促藍(lán)液、染色液等試劑,染色方法等,就能快速、準(zhǔn)確地制作出的冰凍切片。